Ряд патологических состояний сопровождается повышением уровня средних молекул в сыворотке крови и стекловидном теле. В статье представлены результаты собственных исследований образцов, отобранных от трупов, при подозрении на эндогенную интоксикацию. Какие патологии сопровождались повышением концентрации средних молекул?
Методы определения
Екатерина КремезЭндогенная интоксикация — синдром накопления в тканях и биологических жидкостях эндогенных токсических веществ, являющихся избыточными продуктами нормального или нарушенного метаболизма. При этом нарушается механизм детоксикации этих веществ, их биотрансформация и выведение из организма.
Универсальным биохимическим показателем интоксикации служит уровень средних молекул (молекулы средней массы, среднемолекулярные пептиды). Они имеют белковую природу, и их можно отнести к компонентам остаточного азота.
Уровень средних молекул значительно увеличивается при ряде патологических состояний: онкологических заболеваниях, хронической почечной недостаточности, язвенной болезни желудка, поражениях миокарда, печени, термических ожогах, сепсисе и других состояниях, сопровождающихся нарушением гомеостаза. Также повышение среднемолекулярных пептидов может наблюдаться при некоторых вирусных инфекциях.
В настоящее время при определении эндогенной интоксикации в клинической практике применяются скрининговый метод (модификация способа А. Бабеля и соавторов, 1974) и модифицированный способ определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях, описанный в справочнике по клинико-биохимической лабораторной диагностике В. Камышникова.
Первый метод основан на осаждении высокомолекулярных пептидов и белков в сыворотке крови трихлор-уксусной кислотой и количественном определении в полученной после центрифугирования надосадочной жидкости уровня среднемолекулярных пептидов.
Принцип второго метода основан на неоднократном осаждении высокомолекулярных белков крови под действием хлорной кислоты и этилового спирта. К недостаткам скринингового метода относится использование для осаждения белков достаточно слабой трихлоруксусной кислоты. Такой способ не позволяет полностью отделить пептиды средней молекулярной массы от пептидов высокой молекулярной массы, что снижает достоверность и точность полученных результатов при диагностике эндогенной интоксикации.
Вышеперечисленные методы были адаптированы для диагностики эндогенной интоксикации в трупной крови Ю. Морозовым и соавторами, использующими скрининговый метод, и П. Акимовым и соавторами с использованием модифицированного метода.
Применение метода Ю. Морозова для определения средних молекул в судебной экспертной практике не всегда возможно, т. к. в качестве объекта предполагается использовать только негемолизированную сыворотку крови. Получение такой сыворотки может быть затруднительно, особенно при длительном посмертном периоде. П. Акимов и соавторы предложили в качестве альтернативного объекта для определения средних молекул использовать стекловидное тело. Такой объект дает возможность диагностики эндогенной интоксикации при длительном посмертном периоде. Для повышения точности и достоверности результатов при исследовании сыворотки крови авторы разделяли пептиды средней и высокой молекулярной массы поэтапным осаждением белков хлорной кислотой и этиловым спиртом. Показано, что содержание средних молекул более 0,50 г/л в стекловидном теле и более 2,8 г/л в сыворотке крови свидетельствует о наличии синдрома эндогенной интоксикации.
Собственное исследование
При подозрении на эндогенную интоксикацию нами было исследовано 49 образцов. Объектами исследования служили сыворотка крови и стекловидное тело: сыворотка крови и стекловидное тело, отобранные от одного трупа, — 18 образцов; сыворотка крови — 24 образца; стекловидное тело — 7 образцов.
Контрольными образцами служили объекты от трупов, у которых не предполагалось и/или не наблюдалось признаков патологического состояния, связанного с эндогенной интоксикацией: сыворотка крови — 2 образца (причина смерти — острое отравление этиловым спиртом); стекловидное тело — 2 образца (причины смерти — острое отравление этиловым спиртом и механическая асфиксия).
Определение среднемолекулярных пептидов проводили по методике, разработанной П. Акимовым и соавторами.
Концентрация средних молекул в объектах находилась в диапазоне 0,44–15,66 г/л. В 35 исследованных образцах наблюдалось повышенное содержание средних молекул (более 0,50 г/л в стекловидном теле и более 2,8 г/л в сыворотке крови), что составило 71 % от общего количества образцов при подозрении на наличие эндогенной интоксикации. В сыворотке крови и стекловидном теле контрольной группы концентрация среднемолекулярных пептидов не превышала пороговых контрольных значений.
На рисунках 1 и 2 представлены причины смерти лиц, у которых в сыворотке крови и стекловидном теле обнаружена повышенная концентрация средних молекул.
Полученные результаты показывают, что ряд патологических состояний сопровождается повышением уровня средних молекул в сыворотке крови и стекловидном теле трупов.
Методика определения средних молекул достаточно простая и может применяться в обычной биохимической лаборатории.
Тем не менее концентрация средних молекул не может служить специфическим биохимическим маркером эндогенной интоксикации, и полученные результаты могут использоваться только в совокупности с другими биохимическими показателями, данными, полученными при вскрытии, из амбулаторной карты, гистологических исследований и др. Для объективной оценки значения определения молекул средней массы в судебной медицинской практике необходимы дополнительные исследования с использованием большего количества случаев и современных методов статистической обработки.